KlenThermN™ DNA Polymerase

zeigt eine spezifische DNA-Amplifikation und sequenziert auch schwierige Templates
Produkt Artikel-Nr. Packungsgröße Preise
KlenThermN™ DNA Polymerase
GC-023-0100
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
100 u
17,50 € *
KlenThermN™ DNA Polymerase
GC-023-0250
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
250 u
43,75 € *
KlenThermN™ DNA Polymerase
GC-023-0500
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
500 u
87,50 € *
KlenThermN™ DNA Polymerase
GC-023-1000
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
1000 u
175,00 € *
KlenThermN™ DNA Polymerase
GC-023-5000
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
5000 u
875,00 € *

BESCHREIBUNG


Der Austausch von Asn gegen die konservierte Ser543 in der „Daumen“-Untereinheit des großen Fragmentes
(KlenTherm™ DNA Polymerase) der Taq-DNA-Polymerase verhindert ein Pausieren während der DNA-Synthese und erlaubt es dem Enzym Template-Regionen mit einer komplexen Sekundärstruktur zu bewältigen. Das modifizierte Enzym, KlenThermN™ DNA Polymerase, zeigt eine spezifische DNA-Amplifikation und sequenziert auch schwierige Templates, besonders solche mit einem hohen GC-Gehalt oder komplexen Sekundärstrukturen. Außerdem erhöht der Austausch von Asn gegen Ser543 die Syntheseeffizienz langer DNA-Moleküle       (über 2 kb). Je länger das DNA-Fragment, desto stärker zeigt sich der Unterschied in der  Effizienz der Synthese zwischen dem modifizierten und dem nativen Enzym.

CONCENTRATION

10 units/µl


UNIT DEFINITION

One unit is defined as the amount of enzyme that incorporates 10 nmoles of dNTPs into acid-insoluble form in 30 min at 73°C under the assay conditions 25 mM TAPS (tris-(hydroxy-methyl)-methyl-amino-propanesul-fonic acid, sodium salt) pH 9.3 (at 25°C), 50 mM KCl, 3.5 mM MgCl2 , 1 mM .-mercaptoethanol) and activa-ted salmon sperm DNA as substrate.


STORAGE BUFFER

10 mM K-phosphate buffer pH 7.0, 100 mM NaCl, 0.5 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% Tween 20; 50% glycerol (v/v)


STORAGE TEMPERATURE

Store KlenThermN™ DNA polymerase, preferably at -20°C, in a constant temperature freezer.


10X REACTION BUFER

500 mM KCl, 100 mM Tris-HCl (pH 9 at 25°C), 1% Triton X100
Extra solution: 50 mM MgCl 2 , add MgCl 2 to a final concentration of 3.5 mM.
Please note the difference between KlenThermTM and BioThermTM reaction buffers!
1.5 ml 10x reaction buffer Cat. No GC-001-006


COMPANION PRODUCTS

KlenTherm™ DNA polymerase, Synergy™ DNA polymerase, SynergyN™ DNA polymerase, dNTPs


REFERENCES

  1. Ignatov, K.B., Miroshnikov, A.I., Kramarov, V.M. (1998) FEBS Lett. 425, 249-250. Substitution of Asn for Ser543 in the large fragment of Taq DNA polymerase increases the efficiency of synthesis of long DNA molecules.

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