KlenThermase™ DNA Polymerase

KlenThermase™ DNA Polymerase ist eine optimierte Version der KlenTherm™ DNA Polymerase und ist für die zyklische Sequenzierung mit Dideoxynukleotiden entwickelt worden.
Produkt Artikel-Nr. Packungsgröße Preise
KlenThermase™ DNA Polymerase
GC-018-0100
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
100 u
18,00 € *
KlenThermase™ DNA Polymerase
GC-018-0250
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
250 u
45,00 € *
KlenThermase™ DNA Polymerase
GC-018-0500
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
500 u
90,00 € *
KlenThermase™ DNA Polymerase
GC-018-1000
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
1000 u
180,00 € *
KlenThermase™ DNA Polymerase
GC-018-5000
Artikelnummer des Herstellers:
Verfügbarkeit:
5000 u
800,00 € *

BESCHREIBUNG
KlenThermase™ DNA Polymerase ist eine optimierte Version der KlenTherm™ DNA Polymerase und ist für die zyklische Sequenzierung mit Dideoxynukleotiden entwickelt worden. Dieses Enzym ist sowohl für manuelle DNA-Sequenzierungen mit 35S als auch für automatisierte, fluoreszenzmarkierte DNA-Sequenzierungen zu empfehlen. In die KlenTherm™ DNA-Polymerase sind Mutationen eingeführt worden, welche
dem Enzym eine verstärkte Wirksamkeit für die zyklische Sequenzierung von doppelsträngigen PCR-Produkten verleihen.              KlenThermase™ ist ähnlich der USB ThermoSequenase, aber dennoch deutlich anders. Wir empfehlen KlenThermase™ mit unserer hitzestabilen Tth inorganic Pyrophosphatase zu verwenden ( 1 Unit der Tth inorganic Pyrophosphatase zu 10 Unit Klen-Thermase™ geben), um eine noch gleichmäßigere Bandenintensität zu gewährleisten.

PPLICATION

  • Fidelity The relative mutation rate during polymerisation is twofold lower for KlenThermase™ as compared to the full-length Taq DNA polymerase.
  • Cycle sequencing The absence of the 5'-3' exonuclease activity makes KlenThermase™ especially suitable for cycle sequencing. It gives higher sequence intensity and very low backgrounds. The mutational optimization improves the uniformity of band inten-sities. Combination of KlenThermase™ with Tth inorganic pyrophospatase generates uniform bands that improve sequencing accuracy and give long read lengths.


CONCENTRATION

25 units/µl


UNIT DEFINITION

One unit is defined as the amount of enzyme that incorporates 10 nmoles of dNTPs into acid-insoluble form in 30 minutes at 72°C under the assay conditions (25 mM TAPS (tris-(hydroxymethyl)-methyl-aminopropane-sulfonic acid, sodium salt) pH 9.3 (at 25°C), 50 mM KCI, 2 mM MgCl2 , 1 mM .-mercaptoethanol and activa-ted calf thymus DNA as substrate.


STORAGE BUFFER

10 mM K-phosphate buffer pH 7.0, 100 mM NaCI, 0.5 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% Tween 20; 50% glycerol (v/v)


STORAGE TEMPERATURE

Store KlenThermase™ DNA polymerase below 0°C, preferably at -20°C, in a constant temperature freezer.


5X ANNEALING BUFFER

260 mM Tris-HCl (pH 9.5), 65 mM MgCl2


COMPANION PRODUCTS

KlenThermaseN™, KlenTherm™ DNA polymerase, KlenThermN™ DNA polymerase, Tth pyrophosphatase


REFERENCES

  1. Tabor, S. and Richardson, C.C. I995. A single residue in DNA polymerase of the Escherichia coli DNA polymerase 1 family is critical for distinguishing between deoxy- and dideoxyribonucleotides. Proc. Natl. Acad. Scf. USA 92: 6339-6343
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